%0 Journal Article
%T 卡介苗D2株分泌蛋白基因植物表达载体的构建
%A 刘凤娟
%A 俞守义
%A 聂军
%A 陈清
%A 朱丽
%A 芮勇宇
%A 李建栋
%A 江晓玲
%A 吴敏
%A 李志锋
%J 中国公共卫生
%P 1193-1195
%D 2004
%R 10.11847/zgggws2004-20-10-22
%X ？目的克隆卡介苗(BCG)D2株32-kDa分泌蛋白基因(fbpA基因),构建重组植物表达载体pBI121-fbpA,为研制转基因植物口服疫苗奠定基础。方法采用PCR法从BCGD2株基因组DNA中分离fbpA基因,构建重组克隆载体pUCm-T-fbpA,经过单菌落PCR法、BamHⅠ、SacⅠ和HindⅢ单/双酶切、DNA序列分析鉴定后,将fbpA基因亚克隆入植物表达载体pBI121,得到重组载体pBI121-fbpA,并转化根癌农杆菌株EHA105,用PCR法对其进行鉴定。结果重组载体pUCm-T-fbpA测序后证实fbpA基因由1041bp组成,包括1个1014bp的开放阅读框。DNA序列上游由编码一段信号肽的129bp组成,并对32-kDa蛋白的分泌起决定作用。相应的编码成熟蛋白的序列由885个碱基组成。fbpA基因与来源于BCG1173P2株的同一基因序列完全一致。此外,构建的重组植物表达载体pBI121-fbpA成功转入根癌农杆菌株EHA105。结论编码BCGD2株32-kDa分泌蛋白的fbpA基因分离成功,DNA序列分析证实fbpA基因在分枝杆菌中高度保守,为进一步深入分析fbpA基因以及研制抗结核病转基因植物疫苗奠定了基础。
%K 卡介苗
%K 32-kDa蛋白
%K fbpA
%K 克隆
%K DNA序列分析
%K 重组
%K 植物表达载体
%U http://manu40.magtech.com.cn/Jweb_zgggws/CN/abstract/abstract16214.shtml