%0 Journal Article %T 禽流感血凝素HA超表达载体的构建及高表达百脉根的获得 %A 张伟伟 %A 袁蓓 %A 张占路 %A 赵杨敏 %A 徐秉良 %A 吴燕民 %J 草业学报 %P 138-145 %D 2014 %R 10.11686/cyxb20140417 %X 为提高外源抗原蛋白的表达水平,根据已得到的HA-LTB融合基因,通过添加双增强子CaMV35S启动子、增强子Ω序列、内质网滞留信号KDEL序列及加长poly(A)序列等表达调控元件,构建HA-LTB高效融合植物表达载体。利用农杆菌介导方法转化百脉根,获得转基因阳性植株21株,经PCR和RT-PCR检测表明HA-LTB融合基因已整合到百脉根基因组中。利用ELISA检测转基因植株,结果表明LTB免疫佐剂与HA抗原蛋白均具有免疫原性,LTB最高表达量达到0.086μg/mg(蛋白粗提液),HA最高表达量达到0.25μg/mg(蛋白粗提液)。通过植物表达载体的设计和构建,使禽流感血凝素在百脉根中的表达量得到了显著提高,为禽流感可饲疫苗的研制奠定了基础。 %K 百脉根 %K 载体构建 %K HA抗原蛋白 %K LTB免疫佐剂 %K 高表达 %U http://cyxb.lzu.edu.cn/CN/abstract/abstract2123.shtml