%0 Journal Article %T CryⅢA基因植物表达载体构建及马铃薯遗传转化 %A 尤佳 %A 张宁 %A 文义凯 %A 吴家和 %A 司怀军 %A 王蒂 %J 草业学报 %P 248-256 %D 2014 %R 10.11686/cyxb20140130 %X 利用In-Fusion技术将酶切位点不匹配、目的基因内部含载体酶切位点的CryⅢA基因和植物表达载体pBI121相连接,分别成功构建了组成型启动子CaMV35S和马铃薯茎叶特异表达启动子ST-LS1驱动的CryⅢA基因植物表达载体。利用冻融法将2个重组质粒转入根癌农杆菌LBA4404,转化马铃薯栽培品种陇薯3号和甘农薯2号获得了转化植株,经卡那霉素筛选和PCR检测,共有10株阳性植株CryⅢA基因成功整合到马铃薯基因组中。经实时荧光定量PCR检测表明,CryⅢA基因在CaMV35S驱动的CryⅢA转基因植株的根、茎、叶中均有表达,且在叶中表达量较高,茎和根次之;在马铃薯茎叶特异表达启动子ST-LS1驱动的CryⅢA转基因植株中,在根中未见表达,仅在茎、叶中表达,且在叶中表达量较高。 %K In-Fusion %K CryⅢ %K A基因 %K 表达载体 %K 马铃薯 %K 遗传转化 %U http://cyxb.lzu.edu.cn/CN/abstract/abstract2200.shtml