%0 Journal Article
%T 三角紫叶酢浆草ISSR反应体系的建立与优化
%A 胡甦
%A 王永清
%A 陶炼
%J 草业学报
%P 142-150
%D 2011
%X 采用正交设计直观分析法,对影响三角紫叶酢浆草ISSR-PCR反应较大的5个因素(Mg2+、Taq酶、引物、模板DNA、dNTP)在5个水平上进行优化实验;从100个随机引物中筛选出适宜的引物,并筛选出其最佳退火温度;最后对反应程序进行优化。由此首次建立了适合三角紫叶酢浆草的ISSR-PCR反应体系:25μL反应液中含10×buffer2.5μL,Mg2+1.25mmol/L,Taq酶0.9U,引物0.3μmol/L,模板DNA60～100ng,dNTP0.25mmol/L。反应程序为:94℃预变性5min;94℃变性50s,退火时间60s(根据不同引物选择对应最佳退火温度),72℃延伸1.5min,循环40次;72℃延伸7min,4℃保存。这一优化系统的建立为今后利用ISSR标记技术研究酢浆草属植物提供理论依据和技术参考。
%K 三角紫叶酢浆草
%K ISSR
%K 反应体系
%U http://cyxb.lzu.edu.cn/CN/abstract/abstract2984.shtml