%0 Journal Article %T 一管酒精法提取转基因小鼠胚胎组织基因组的实验方法及应用 %A 翁敏杰 %A 杜建霖 %A 蒲荻 %A 张进 %A 李晓群 %A 刘亚杰 %A 佘强 %J 重庆医科大学学报 %D 2012 %X 目的:优化提取基因组的方法,建立高效、简便、快速提取基因组DNA的方法,用于大批量转基因小鼠鉴定。方法:用一管酒精基因组DNA抽提法抽提基因组DNA。结果:经过分光光度法检测基因组DNA浓度、纯度及电泳分析DNA质量,显示一管酒精抽提法提取的基因组与经典酚氯仿提取法提取的基因组产量、纯度及质量没有明显差别;酶切全基因组后,2种方法获得的基因组都可以被酶完全切开;两者模板都能成功应用PCR扩增来鉴定基因敲入小鼠并可应用于基因组测序及Real-timePCR检测基因敲入小鼠中外源基因并鉴定其相对拷贝数。结论:一管酒精基因组抽提法得到的DNA质量可靠,可高效、简便、快速鉴定转基因小鼠及进行基因组DNA酶切、测序、Real-timePCR等后续实验。 %K T盒转录因子18 %K 基因敲入 %K 基因组DNA %U http://cyxb.alljournals.ac.cn/cqydxb/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20120410&flag=1