%0 Journal Article
%T Rabex-5基因RNAi慢病毒表达载体的构建及其在MCF-7中对Rabex-5表达的影响
%A 闵　捷
%A 厉红元
%A 潘　雪
%A 李　焰
%A 王颖建
%A 张　翔
%A 梁欣洁
%J 重庆医科大学学报
%D 2012
%X 目的：构建Rabex-5RNAi慢病毒表达载体，并转染人乳腺癌细胞株MCF-7，观察其对Rabex-5基因的沉默效应。方法：将设计合成的单链引物退火成双链oligo序列，连接入经AgeⅠ和EcoRⅠ双酶切线性化的pMAGic慢病毒质粒载体中，经转化DH5?琢感受态细胞并筛选出阳性克隆，测序鉴定。用293FT细胞包装产生慢病毒，感染MCF-7细胞，利用Real-timePCR和Westernblot鉴定抑制Rabex-5表达的效果。结果：PCR与测序鉴定证实成功构建了Rabex-5RNAi的慢病毒载体，转染MCF-7细胞后，与未干扰组和阴性对照组相比，Rabex-5的mRNA和蛋白表达下调，以RNAi3的沉默效应最佳。结论：成功构建了Rabex-5RNAi慢病毒表达载体，其可使MCF-7细胞株Rabex-5表达下调，为进一步研究靶向Rabex-5RNAi对乳腺癌细胞恶性生物学行为变化及基因治疗研究奠定了实验基础。
%K Rabex-5
%K RNA干扰
%K 慢病毒载体
%K 人乳腺癌细胞株MCF-7
%U http://cyxb.alljournals.ac.cn/cqydxb/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20120108&flag=1