%0 Journal Article %T 设计特异性结合HBVX基因启动子的人工锌指蛋白以抑制HepG2.2.15细胞中HBV的转录 %A 祝艺耘 %A 付 愚 %A 李中堂 %A 刘 锐 %A 魏续福 %A 吴忠均 %J 重庆医科大学学报 %D 2014 %X 目的:设计人工锌指蛋白(zincfingerprotein,ZFP)特异性结合于乙型肝炎病毒X蛋白(hepatitisBvirusXprotein,HBX)基因启动子,观察ZFP在体外对乙型肝炎病毒(hepatitisBvirus,HBV)转录的抑制。方法:将pcDNA3.1-ZFP转染入HepG2.2.15细胞24h后,用Westernblot检测HBX蛋白的含量;用ELISA和real-timePCR检测上清液中乙型肝炎核心相关抗原(hepatitisBeantigen,HBeAg)和HBVDNA含量,用RT-PCR检测胞内HBVmRNA水平。结果:ZFP可抑制HepG2.2.15细胞中HBX的表达;相比空质粒组,ZFP组细胞培养上清液中HBVDNA拷贝量和HBeAg含量分别下降了51.7%(t=23.079,P=0.000,95%CI=44.98%~58.52%)、33.8%(t=3.887,P=0.003,95%CI=12.12%~55.48%);细胞内HBVmRNA也明显减少(t=3.616,P=0.022)。结论:人工设计的可特异性结合于HBX的ZFP可于HepG2.2.15细胞中有效抑制HBV转录。 %K 乙型肝炎病毒 %K X基因启动子 %K 锌指蛋白 %K HepG2.2.15细胞 %U http://cyxb.alljournals.ac.cn/cqydxb/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20140706&flag=1