%0 Journal Article %T 三基序蛋白25过表达对肺癌细胞H1299顺铂敏感性的影响 %A 屈 灿 %A 邱 峰 %A 陈世知 %A 粟 林 %A 敬怀志 %J 重庆医科大学学报 %D 2014 %X 目的:初步探讨三基序蛋白25(tripartitemotifcontaining25,TRIM25)过表达对人肺癌细胞株H1299顺铂敏感性的影响及其分子作用机制。方法:应用基因克隆技术构建TRIM25高表达质粒载体,瞬时转染人肺癌细胞株H1299,荧光显微镜下观察转染效率,Westernblot法检测TRIM25蛋白表达水平及其过表达时丙酮酸激酶M2(pyruvatekinaseisozymetypeM2,PKM2)蛋白水平的变化。用顺铂分别处理转染前后的H1299细胞24h,MTT法检测细胞耐药性,AnnexinV/PI双染法流式细胞仪(flowcytometry,FCM)检测细胞凋亡。结果:同H1299空白组和转染pGCMV/neo空载体组比较,pGCMV-trim25转染组细胞中TRIM25蛋白的表达水平明显增加(P=0.003,P=0.005);且TRIM25过表达时,细胞中PKM2蛋白的表达水平降低(P=0.001,P=0.003)。用顺铂处理后,pGCMV-trim25转染组细胞的药物敏感性显著下降(P<0.001),转染组细胞凋亡率亦明显降低(P<0.001)。结论:TRIM25在肺癌细胞H1299中高表达时,可能通过下调PKM2而降低对顺铂的敏感性。 %K 高表达载体 %K 三基序蛋白25 %K 丙酮酸激酶M2 %K 肺癌细胞H1299 %K 药物敏感性 %U http://cyxb.alljournals.ac.cn/cqydxb/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20140323&flag=1