%0 Journal Article %T VEGF-C联合HGF促进间充质干细胞向淋巴管内皮细胞分化的研究 %A 石正华 %A 薛 斌 %A 蒋 娟 %J 重庆医科大学学报 %D 2015 %X 目的:使用血管内皮细胞生长因子C(vascularendothelialgrowthfactorC,VEGF-C)与肝细胞生长因子(hepatocytegrowthfactor,HGF)联合诱导大鼠骨髓间充质干细胞(bonemarrow-derivedmesenchymalstemcells,BMSCs)向淋巴管内皮细胞(lymphaticendothelialcells,LECs)方向分化,寻求最适HGF浓度,探索HGF的促分化机制。方法:原代培养获得BMSCs,流式细胞仪检测相关表面抗原以及向成骨诱导分化鉴定干细胞特性,取原代培养第3代细胞进行诱导实验。设置50ng/mlVEGF-C分别联合10、20、40、60、80、100ng/mlHGF配置诱导培养基的6个联合诱导组以及同时设置50ng/mlVEGF-C诱导组、50ng/mlHGF诱导组和空白对照组,诱导10d后利用real-timePCR检测各组LECs标志性分子淋巴管内皮细胞透明质酸受体-1(lym-phaticendothelialhyaluronanreceptor1,LYVE-1),同源异形盒蛋白1(prosperohomeoboxprotein1,Prox1)的表达,得出HGF最适浓度。Westernblot、real-timePCR检测HGF诱导组、空白对照组、VEGF-C诱导组的LECs标志性分子LYVE-1、Prox1的表达,以及检测空白对照组、VEGF-C诱导组、HGF联合VEGF-C诱导组的integrinα9的表达。结果:成功分离获得原代培养大鼠BMSCs,80ng/mlHGF联合50ng/mlVEGF-C诱导组的LYVE-1、Prox1的mRNA表达量最高(PProx1=0.000,PLYVE-1=0.000),同时HGF诱导组未检测到相关LECs标志性分子的表达,HGF联合VEGF-C诱导组的integrinα9的表达较VEGF-C诱导组明显提高(PWesternblot=0.001,Preal-timePCR=0.000)。结论:当HGF浓度为80ng/ml时,此时HGF联合VEGF-C可更好地促进大鼠BMSCs向LECs分化。同时,在该浓度条件下HGF不具有单独诱导大鼠BMSCs分化为LECs的能力,但能在诱导分化过程中明显提高integrinα9的表达,证明在促分化过程中HGF可能是通过间接上调integrinα9表达发挥作用。 %K 骨髓间充质干细胞 %K 血管内皮细胞生长因子C %K 肝细胞生长因子 %K 淋巴管内皮细胞 %U http://cyxb.alljournals.ac.cn/cqydxb/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=201506011&flag=1