%0 Journal Article %T miR-124-3p通过负调控Caveolin-1表达N2a/APPswe细胞凋亡率及细胞内钙离子浓度 %A 向 月 %A 张 雄 %A 杨 军 %A 戴颂阳 %A 李 昱 %J 重庆医科大学学报 %D 2015 %X 目的:探讨在阿尔茨海默病(Alzheimer’sdiseases,AD)细胞模型中miR-124-3p通过调控Caveolin-1的表达对细胞凋亡率及钙离子浓度的影响。方法:体外培养野生型N2a(N2a/WT)和N2a/APPswe细胞,real-timePCR及Westernblot分别检测miR-124-3p与β-淀粉样蛋白前体蛋白(β-amyloidprecursorprotein,APP)mRNA及蛋白的表达。双荧光素酶报告实验分析miR-124-3p与Caveolin-1之间靶向调控关系。N2a/APPswe细胞瞬时转染miR-124-3p模拟物(mimics),real-timePCR、Westernblot分别检测Caveolin-1mRNA和蛋白的表达。N2a/APPswe细胞分别瞬时转染miR-124-3p模拟物(mimics)、pcDNA-Caveolin-1、Caveolin-1-siRNA,流式细胞仪分析细胞凋亡水平,测定细胞内游离钙离子浓度。结果:与WT组相比,APPswe组APPmRNA和蛋白水平表达都明显升高(分别为P=0.000,P=0.000),miR-124-3p表达明显降低(P=0.000)。双荧光素酶报告实验表明,和与突变型载体(pGL3-Caveolin-13’UTRMUT)共转染组相比,与野生型载体(pGL3-Caveolin-13’UTRWT)共转染组的相对荧光素酶活性和明显减弱(P=0.004);转染miR-124-3pmimics后,与空载体组比较,miR-124-3pmimcs转染组的Caveolin-1mRNA和蛋白的表达明显下调(分别为P=0.000,P=0.000);分别转染miR-124-3pmimics、Caveolin-1-siRNA后,与空载体组比较,细胞凋亡率降低(分别为P=0.000,P=0.000),游离钙离子浓度降低(分别为P=0.000,P=0.000);转染pcDNA-Caveolin-1后,得到与上述相反的结果(分别为P=0.000,P=0.000)。结论:miR-124-3p可以通过靶向下调Caveolin-1的表达,抑制AD细胞凋亡,降低细胞中游离钙离子浓度,从而发挥神经保护作用,为AD的防治提供新的思路和靶点。 %K miR-124-3p %K Caveolin-1 %K N2a/APPswe细胞 %K 凋亡 %K 钙离子浓度 %U http://cyxb.alljournals.ac.cn/cqydxb/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=201505007&flag=1