%0 Journal Article %T 蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子表达对喉癌细胞株Hep-2增殖的影响及相关机制研究 %A 何晓丽 %A 谭 健 %A 莫海兰 %A 汪永宽 %A 李 兵 %J 重庆医科大学学报 %D 2015 %X 目的:研究蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子(cancerousinhibitorofproteinphosphatase2A,CIP2A)表达对喉癌细胞株Hep-2增殖的影响及相关分子机制。方法:以特异性siRNA和阴性对照序列转染喉癌Hep-2细胞,实验分为CIP2AsiRNA组与ControlsiRNA组。平板克隆形成实验检测CIP2A在喉癌细胞增殖中的作用;MTT法检测CIP2A对细胞生长曲线及顺铂敏感性影响;流式细胞术检测细胞周期分布和凋亡率的改变。real-timePCR检测CIP2AmRNA表达水平,Westernblot检测CIP2A及生长相关蛋白c-myc、AKT、p-AKT、cyclinD1的蛋白表达水平。结果:沉默CIP2A后,CIP2A在基因及蛋白水平的表达量明显降低,Hep-2细胞生长减缓,克隆的形成被抑制,ControlsiRNA组为339.00±34.00,CIP2AsiRNA组为126.00±33.00,差异有统计学意义(t=-7.796,P=0.010);沉默CIP2A可增加喉癌细胞对顺铂的敏感性,ControlsiRNA组IC50为(6.67±0.54)?滋g/ml,CIP2AsiRNA组为(3.53±0.32)?滋g/ml,差异有统计学意义(t=8.598,P=0.001);细胞周期阻滞于G1期,ControlsiRNA组G1期细胞比例为66.860±1.972,CIP2AsiRNA组为74.613±3.357,差异有统计学意义(t=3.449,P=0.026);S期细胞比例减少,ControlsiRNA组为23.713±1.564,CIP2AsiRNA组为17.747±1.255,差异有统计学意义(t=-5.153,P=0.007);沉默CIP2A没有引起细胞凋亡率的变化(P=0.216)。Westernblot结果显示,沉默CIP2A表达可下调CyclinD1(t=-4.531,P=0.011)、c-myc(t=-4.522,P=0.011)、p-AKT(t=-4.574,P=0.010)的表达,但对总AKT蛋白的表达没有影响(t=0.051,P=0.962)。结论:沉默CIP2A基因可抑制喉癌Hep-2细胞生长,增加喉癌细胞对顺铂的敏感性,其机制可能与下调c-myc、p-AKT、cyclinD1的表达有关。 %K 喉肿瘤 %K 蛋白磷酸酶2A的癌性抑制因子 %K siRNA %K 药物敏感性 %K 增殖 %K 凋亡 %U http://cyxb.alljournals.ac.cn/cqydxb/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=201503024&flag=1