%0 Journal Article
%T Cry1Ac的绿色荧光蛋白GFP标记及其在棉铃虫幼虫中肠的定位分布
%A 史艳霞
%A 张永军
%A 王桂荣
%A 梁革梅
%A 高继国
%A 吴孔明
%J 植物保护学报
%P 455-460
%D 2007
%X 为了明确Cry1Ac蛋白在棉铃虫体内与中肠组织的相互作用,采用重叠PCR方法将Bt-cry1Ac基因和绿色荧光蛋白GFP基因融合,构建含Cry1Ac毒蛋白和绿色荧光蛋白GFP原核表达载体,并在大肠杆菌大量表达。利用荧光显微镜观察发现,表达Cry1Ac-GFP融合蛋白的大肠杆菌在蓝光激发下发出绿色荧光。将含有融合蛋白的菌液拌入人工饲料饲喂3龄棉铃虫幼虫96？h,取棉铃虫幼虫中肠做冰冻切片并在荧光显微镜下观察。结果显示,取食含有Cry1Ac-GFP融合蛋白饲料的棉铃虫幼虫中肠能够发出强烈荧光。比较Cry1Ac杀虫蛋白敏感和抗性棉铃虫幼虫中肠的发光部位,敏感棉铃虫幼虫的中肠围食膜已经消失,肠壁细胞发出强烈的荧光,而抗性棉铃虫的围食膜较健全并发出荧光。
%K Cry1Ac毒蛋白
%K 绿色荧光蛋白GFP
%K 重叠PCR
%K 定位分布
%U http://www.zwbhxb.com.cn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20070502&flag=1