%0 Journal Article
%T 海芋凝集素AML的原核表达及其多克隆抗体制备
%A 侯学文
%A 黄剑威
%A 何国卿
%J 植物保护学报
%P 313-318
%D 2010
%X 为了制备海芋凝集素(Alocasiamacrorrhizalectin,简写AML)的多克隆抗体,分别构建了AML全长及部分片段的原核表达载体,并利用获得的原核表达的AML片段免疫新西兰雄兔获得抗血清。结果表明,含AML全长的原核表达载体pET30a(+)-AMLcDNA的原核表达宿主菌株Rosetta(DE3),在加入不同浓度的诱导剂IPTG后,菌液浓度出现短暂增加后逐渐下降,且下降幅度与加入的IPTG浓度呈正相关,同时用SDS-PAGE电泳法未检测到预期融合蛋白的形成;而含AML片段的原核表达载体pET30a(+)-AMLcDNA(270-613)的原核表达宿主菌株Rosetta(DE3),在IPTG诱导下能正常生长,且能诱导出预期大小的融合蛋白。利用制备型SDS-PAGE法纯化此融合蛋白作为抗原免疫新西兰雄兔获得抗血清,用该抗血清作为一抗进行Westernblot,在海芋块茎、叶、叶柄和诱导菌体中均能检测到相应分子量的AML条带,表明制备的AML多克隆抗体可以用于检测AML。
%K 海芋凝集素
%K 原核表达
%K 多克隆抗体
%U http://www.zwbhxb.com.cn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20100413&flag=1