%0 Journal Article %T 用酵母双杂交筛选与南瓜蚜传黄化病毒MP互作的寄主因子 %A 陈小慧 %A 费菲 %A 向海英 %A 韩成贵 %A 程玉琴 %J 植物保护学报 %P 331-335 %D 2010 %X 植物病毒编码的移动蛋白(movementprotein,MP)介导病毒在寄主体内的移动,研究其与寄主间的分子互作有助于揭示病毒侵染过程中的分子机制。将南瓜蚜传黄化病毒Cucurbitaphid-borneyellowsvirus(CABYV)MP基因定向克隆到含有DNA结合功能域(DNA-bindingdomain,BD)载体上,并构建与激活功能域(activationdomain,AD)融合表达的西瓜茎叶cDNA文库,然后用MP为诱饵筛选文库寻找与其互作的寄主因子。结果表明,诱饵质粒插入的MP基因可读框和氨基酸序列均正确,对酵母菌株AH109和Y187没有自主激活能力;文库滴度为2.94×106CFU/mL,且大多数插入片段在700?bp以上,质量符合筛选要求;经过筛选和共转化回转验证,有48个候选阳性克隆与MP在酵母中互作。测序得到这些克隆的cDNA序列,BLAST分析结果表明,这些克隆共编码12种蛋白。 %K cDNA文库 %K 酵母双杂交筛选 %K 西瓜 %K 诱饵质粒 %U http://www.zwbhxb.com.cn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20100409&flag=1