%0 Journal Article %T 马铃薯Y病毒复制酶基因不同位置cDNA区段介导对PVY的不同抗性 %A 徐丽 %A 宋云枝 %A 王文俊 %A 朱常香 %A 温孚江 %J 植物保护学报 %P 227-233 %D 2010 %X 为探究靶序列位置对RNA介导的病毒抗性产生的影响,利用聚合酶链式反应(polymerasechainreaction,PCR)技术扩增马铃薯Y病毒(PotatovirusY,PVY)复制酶基因(nuclearinclusionb,NIb)不同位置的cDNA区段,反向插入双元载体pROKII中,构建了发夹RNA(hairpinRNA,hpRNA)结构的植物表达载体。将构建的植物表达载体采用冻融法转入农杆菌LBA4404,叶盘法转化烟草NC89,获得转基因植株。攻毒试验表明:PVYNIb基因不同位置cDNA区段介导的对PVY的抗性存在显著差异;3'端1/2处和中间位置的序列可介导高水平的病毒抗性,抗性植株的比例在50%以上,而5'端、5'端1/2处和3'端的序列介导的抗性效率较低,抗性植株的比例仅为10%~30%。Northern杂交显示:抗病植株中RNA的积累量明显低于同类型的感病植株,抗性与RNA积累量呈负相关;抗病转基因植株中有siRNA存在,表明病毒抗性是由RNA介导的。 %K 马铃薯Y病毒 %K 复制酶基因 %K RNA介导的病毒抗性 %U http://www.zwbhxb.com.cn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20100318&flag=1