%0 Journal Article
%T 啤酒花矮化类病毒实时荧光定量RT-PCR检测方法的建立与应用
%A 赵晓丽
%A 周琦
%A 孙宁
%A 邓丛良
%J 植物保护学报
%P 309-314
%D 2013
%X 为建立一种快速、灵敏、特异的定量检测啤酒花矮化类病毒(Hopstuntviroid,HSVd)的实时荧光定量RT-PCR(RT-qPCR)方法,设计了2对引物及特异探针,体外转录制备了RNA标准品,绘制标准曲线,并对该方法的特异性、灵敏度和重复性进行评估。建立的定量标准曲线Ct值与模板拷贝数对数之间呈良好的线性关系,相关系数R2为0.9988,扩增效率为95%;该方法的特异性好,与啤酒花潜隐类病毒(HLVd)、葡萄黄斑类病毒1(GYSVd-1)、葡萄黄斑类病毒2(GYSVd-2)和桃潜隐花叶类病毒(PLMVd)均无交叉反应;灵敏度为1.0×102拷贝/μL,比普通RT-PCR高10倍;试验内及试验间重复性试验的变异系数均小于3%。研究表明该方法适用于实际样品中HSVd的快速定量检测。
%K 啤酒花矮化类病毒
%K 定量
%K 检测
%K 实时荧光定量RT-PCR
%U http://www.zwbhxb.com.cn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20130403&flag=1