%0 Journal Article
%T 大豆花叶病毒CP基因RNAi载体的构建及大豆遗传转化
%A 高乐
%A 翟锐
%A 丁雪妮
%A 李凯
%A 廖文林
%A 智海剑
%J 植物保护学报
%P 453-460
%D 2014
%X 为获得含有大豆花叶病毒（Soybeanmosaicvirus，SMV）CP基因干扰片段的转基因大豆新材料，对11个SMV流行株系的CP基因进行了核苷酸序列比对，采用GATEWAY技术构建了RNA干扰（RNAinterference，RNAi）载体pB7GWIWG2（Ⅱ）-CPi，对重组载体测序比对，通过酶切以及PCR方法鉴定载体，并利用农杆菌介导的转基因体系进行大豆遗传转化。克隆出264bp高度保守的CPi干扰片段，通过测序证实其与目标序列的匹配度达到100%；重组质粒经过XbaⅠ单酶切后出现783bp和10818bp两条带，经过EcoRⅠ、HindⅢ双酶切后出现2256bp和9346bp两条带，说明2个ccdB结合位点均被CPi取代；PCR反应得到474bp和460bp两条带，说明CPi以反向重复形式与pB7GWIWG2（Ⅱ）组合。共获得10棵T0代转基因幼苗，经除草剂涂抹、PCR、PAT/bar转基因检测试纸检测后，6株为阳性，表明该方法可筛选出对大豆花叶病毒具有抗性的转基因大豆新种质，为SMV抗病育种工程提供良好的亲本材料。
%K 大豆花叶病毒
%K CP基因
%K RNAi
%K GATEWAY技术
%K 农杆菌介导大豆转基因
%U http://www.zwbhxb.com.cn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20140411&flag=1