%0 Journal Article
%T 水稻黑条矮缩病毒外壳蛋白基因的克隆、原核表达及抗体制备
%A 宋云枝
%A 姜雅元
%A 毕吕杰
%A 温孚江
%A 朱常香
%J 植物保护学报
%P 35-40
%D 2014
%X 为探讨水稻黑条矮缩病毒（Riceblack-streakeddwarfvirus，RBSDV）的种群变异，采用RT-PCR方法从感染RBSDV山东分离物RBSDV-JN1的水稻中克隆该病毒的S10片段，并进行序列分析，进而构建包含RBSDV-JN1的CP基因的原核表达载体，导入大肠杆菌EscherichiacoliBL21（DE3）诱导表达；并以表达的融合蛋白为抗原，制备病毒的多克隆抗体。结果显示：S10片段全长为1801bp，包含1个1677bp编码框，编码558个氨基酸的外壳蛋白（CP）；与GenBank已注册的19个RBSDV的CP基因序列相比较发现，病毒各分离物间核苷酸的序列相似性为90.5%~99.8%，氨基酸的序列相似性为95.9%~100.0%；地理位置较近的分离物间序列相似性较高，RBSDV种群分布呈现区域性差异。原核表达载体pET-RBSDV-CP经IPTG诱导，获得了分子量约为63kD带有His标签的目的蛋白。用该蛋白制备的多克隆抗体经ELISA、Westernblot和Dot-blotELISA检测显示，效价为1：81000，且具有良好的特异性。
%K 水稻黑条矮缩病毒
%K 外壳蛋白
%K 序列分析
%K 原核表达
%K 多克隆抗体
%U http://www.zwbhxb.com.cn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20140106&flag=1