%0 Journal Article
%T 李属植物检疫性丁香疫霉和栗黑水疫霉的三重PCR分子检测
%A 刘跃庭
%A 朱林慧
%A 李培江
%A 廖芳
%A 任学毅
%A 李关荣
%J 植物保护学报
%P 571-577
%D 2015
%X 为建立我国禁止进境的2种检疫性真菌丁香疫霉Phytophthorasyringae和栗黑水疫霉P.cambivora的同步分子检测方法,根据疫霉属的18SrRNA、HSP90和Ypt1基因分别设计通用引物、丁香疫霉和栗黑水疫霉的特异性引物,建立三重PCR检测方法,并进行灵敏度测试和模拟带菌试验。结果表明,可同时检测李属植物上丁香疫霉和栗黑水疫霉的特异三重PCR检测体系为:最佳引物浓度组合18SUF/18SUR、PCSF/PCSR和PSSF/PSSR依次为0.2、0.8、1.0μL,最佳退火温度为63℃,最佳退火时间为20s。该体系扩增丁香疫霉出现884bp的18SrRNA条带和683bp的HSP90基因特异条带,扩增栗黑水疫霉出现884bp的18SrRNA条带和314bp的Ypt1基因特异条带,对照菌只出现18SrRNA条带;三重PCR反应体系检测灵敏度低于单重PCR;模拟带菌试验可同时扩增出3个片段。表明该三重PCR检测方法能实现丁香疫霉和栗黑水疫霉的同步特异性检测,可有效改进李属类水果及其种苗上检疫性疫霉的快速检测。
%K 李属
%K 检疫性真菌
%K 丁香疫霉
%K 栗黑水疫霉
%K 三重PCR检测
%U http://www.zwbhxb.com.cn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20150414&flag=1