%0 Journal Article %T PEG介导高山红景天原生质体融合获同源四倍体研究 %A 刘剑锋 %A 刘建华 %A 程云清 %A 钟雪 %A 陈智文 %J 中国中药杂志 %D 2010 %X 目的:获得高山红景天同源四倍体新材料。方法:用高山红景天愈伤组织原生质体为材料,进行了40%PEG6000介导的原生质体融合,对融合后原生质体进行了低密度、低融点琼脂包埋培养。按原生质体大小对融合原生质体进行了活体标记,建立了起源于单个原生质体的单细胞姊妹系,获得同源四倍体材料。结果:新生子细胞、中期细胞及其原生质体的直径RD与RM均与公式RD=0.7937RM大致相符。未融合的二倍体、两原生质体融合产物直径的变化范围分别为16.7μm≤R<21.3μm,21.0μm≤R'<26.8μm,两者直径范围存在部分重叠。融合原生质体培养时,接种密度以1×104个/mL为宜,在此密度条件下植板率为20.3%,单细胞起源的姊妹系微克隆生长迅速,易于进行标记、彼此分离并继续培养;染色体计数的结果表明,二倍体、四倍体单细胞姊妹系再生植株染色体数目分别为26,52,不同节位叶片经流式细胞仪检测了DNA含量,证实没有嵌合体的存在。结论:本研究为高山红景天多倍体育种提供了科学依据。 %K 高山红景天 %K 原生质体 %K 聚乙二醇 %K 四倍体 %U http://www.cjcmm.com.cn/cjcmm/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20101401&flag=1