%0 Journal Article %T 桑遗传转化体系的建立及槲皮素合成的研究 %A 李想韵 %A 朱鸿 %A 孙一铭 %A 孙敏 %J 中国中药杂志 %D 2010 %X 目的:建立桑的遗传转化体系,并对其毛状根生长特性和次生代谢产物槲皮素含量进行探索。方法:利用卸甲型根癌农杆菌AgrobacteriumtumefaciensC58C1侵染桑的黄化无菌苗,建立毛状根的诱导与培养体系;优化毛状根的扩大培养条件并测定其生长曲线,对桑毛状根T-DNA转化结果进行PCR检测;利用RP-HPLC检测槲皮素的含量。结果:用C58C1侵染无菌苗外植体,侵染10min、分别预培养、共培养2d及添加质量浓度为100mg·L-1的乙酰丁香酮(AS)可得最高转化率;PCR检测结果表明,发根农杆菌Ri质粒的rolB,rolC基因片段已整合入桑的毛状根基因组中;C58C1侵染桑黄化无菌苗茎段10d后,茎段伤口处陆续产生毛状根,30d后幼茎上产生毛状根的外植体达92%;在1/2MS+0.05mg·L-1IBA液体培养基中培养50d后,由HPLC检测结果表明,毛状根中槲皮素含量相比于原植株增加了8.5倍。结论:成功建立桑科毛状根诱导与离体培养体系,为其他木本植物毛状根培养的研究提供了参考,并进一步为槲皮素等药用活性成分的工业化生产奠定了基础。 %K 桑 %K 遗传转化 %K 毛状根 %K 槲皮素 %K HPLC %U http://www.cjcmm.com.cn/cjcmm/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20101106&flag=1