%0 Journal Article %T 位点特异性PCR方法的建立及对近源种鹿茸药材的鉴别研究 %A 王学勇 %A 刘春生 %A 张蓉 %A 黄璐琦 %A 崔光红 %J 中国中药杂志 %D 2009 %X 目的:针对正品鹿茸与近源种鹿茸药材饮片鉴别的难点,建立一种简便、快速、准确的近源种鹿茸药材分子鉴别方法。方法:根据鹿科鹿属种动物Cytb全序列比对分析,设计1对能准确鉴别正品鹿茸(包括梅花鹿和马鹿)和其他近源种鹿茸的引物,在此基础上建立鹿茸药材位点特异性PCR鉴别方法,并对影响PCR结果的主要因素退火温度、Taq用量、循环次数以及模板用量和重复性等进行方法学考察和优化。结果:在方法学考察的基础上,在25μLPCR反应体系,退火温度为65℃的条件下,能准确扩增出约323bp大小的阳性DNA条带,经测序验证结果表明,系正品鹿茸原动物的Cytb基因序列片段,而伪品鹿茸未扩增出条带。结论:所建立的位点特异性PCR方法,能将正品鹿茸与其他近源种鹿茸药材鉴别开来,具有较高的特异性、重复性,可广泛应用于鹿类药材的鉴别。 %K 位点特异性PCR %K 近源种鹿茸药材 %K 鉴别 %U http://www.cjcmm.com.cn/cjcmm/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20092307&flag=1