%0 Journal Article %T 麻疯树核糖体失活蛋白curcin在大肠杆菌中高效表达条件的研究 %A 罗孟军1 %A 2 %A 陈放2 %A 颜钫2 %A 刘伟信1* %J 中国中药杂志 %D 2009 %X 目的:编码麻疯树毒蛋白(curcin)成熟蛋白的基因原核表达载体的构建及其高效表达条件的研究。方法:根据GenBank上麻疯树的cDNA序列设计引物,用PCR方法从麻疯树基因组中扩增得到编码麻疯树毒蛋白成熟蛋白的基因;将其导入原核表达载体pQE30,pET32中,并将其转入大肠杆菌获得重组菌株。在不同诱导剂、不同温度、不同诱导时间等条件下诱导其产生重组蛋白并进行检测比较。结果:用PCR方法从麻疯树基因组中扩增得到编码麻疯树毒蛋白成熟蛋白的基因,成功构建了原核表达载体pQER,pETR,并获得重组菌株PRM,PRB。在不同诱导剂、不同温度、不同诱导时间等条件诱导下,PRB均无重组蛋白产生,而PRM却能以包涵体的形式表达curcin。结论:重组菌PRM在诱导6h,28℃,IPTG05mmol·L-1时表达curcin蛋白的效率最高。 %K 麻疯树 %K 核糖体失活蛋白 %K 表达载体 %K 大肠杆菌 %K 诱导表达 %U http://www.cjcmm.com.cn/cjcmm/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=13291&flag=1