%0 Journal Article %T 用抑制性差减杂交构建As2O3诱导的NB4细胞凋亡相关基因文库 %A 狄春红1 %A 2 %A 顾少华4 %A 谭晓华2 %A 仙玲玲2 %A 吴奇涵3 %A 杨 磊2* %J 中国中药杂志 %D 2009 %X 目的:构建三氧化二砷(As2O3)诱导的急性早幼粒细胞白血病细胞株NB4细胞凋亡相关基因文库。方法:用含4μmol?L-1As2O3和正常培养基培养NB4细胞24h,抽提总RNA,经逆转录酶合成双链cDNA,分别以砷诱导凋亡组和对照组作为tester和driver,进行双向抑制性差减杂交(suppress-ionsubtractivehybridization,SSH),筛选As2O3诱导的NB4细胞凋亡相关基因,将差异表达基因进行PCR扩增并与pGEM-Teasy克隆载体连接,转化DH5α大肠杆菌,经蓝白斑筛选获得白色阳性克隆,PCR扩增出未知基因片段。结果:成功构建了分别代表在NB4细胞中表达上调和下调的基因文库。结论:经双向抑制性差减杂交获得了NB4细胞差异表达基因文库,为克隆NB4细胞凋亡相关基因奠定了基础。 %K 白血病 %K NB4细胞 %K 三氧化二砷 %K 抑制性差减杂交 %K 凋亡 %U http://www.cjcmm.com.cn/cjcmm/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=13241&flag=1