%0 Journal Article
%T 人参铜锌超氧化物歧化酶原核表达载体的构建、表达及纯化
%A 林红梅
%A 王泽玉
%A 邵玥
%A 秦晓晔
%A 刘诗超
%A 张鑫
%A 杨利民
%J 中国中药杂志
%D 2013
%X 研究提取人参叶中的总RNA，采用RT-PCR扩增人参叶Cu/Zn-SOD基因，构建pET-28（a）-Cu/Zn-SOD原核表达载体。使用EscherichiacoliBL21（DE3）感受态细胞进行IPTG诱导表达。利用镍离子亲和层析进行纯化，并采用黄嘌呤氧化酶法测定目的蛋白的酶活。经RT-PCR扩增的人参Cu/Zn-SOD基因序列与GenBank数据库中公布的高丽参Cu/Zn-SOD基因序列同源性为99.00%。经IPTG诱导，目的蛋白的表达量约为44.42%，相对分子质量为16.30kDa。纯化后的蛋白酶活可达到10596.69U·mg-1。通过分子生物学方法，成功构建了人参pET-28（a）-Cu/Zn-SOD原核表达载体，为进一步研究人参Cu/Zn-SOD生物学功能奠定了基础。
%K 人参
%K Cu/Zn-SOD
%K 原核表达
%U http://www.cjcmm.com.cn/cjcmm/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20132312&flag=1