%0 Journal Article %T 快速PCR方法在蛇类药材真伪鉴别中的应用 %A 陈康 %A 蒋超 %A 袁媛 %A 黄璐琦 %A 李曼 %J 中国中药杂志 %D 2014 %X 为优化获得一种准确、快速、高效鉴别药典所载蛇类药材(乌梢蛇,金钱白花蛇,蕲蛇)真伪品的方法。该研究以蛇类药材经典PCR鉴定方法为基础,采用碱裂解法提取基因组总DNA,加入特异性PCR引物,采用两步法进行PCR扩增,从而对蛇类药材及其混淆品进行鉴别。通过对影响PCR反应时间的退火温度、变性温度、退火时间、变性时间、循环次数等因素进行优化,并对不同型号PCR仪和Taq酶进行考察,分别获得乌梢蛇、金钱白花蛇、蕲蛇快速PCR反应程序。在PCR产物中加入SYBRGreenI染料,正品显示出明亮绿色荧光,而混淆品不显示荧光。所建立的蛇类药材快速PCR真伪检测方法可在30~45min完成,为蛇类药材现场快速鉴定提供技术支持。 %K 快速PCR %K 蛇类中药材 %K 分子鉴定 %K 荧光检测 %U http://www.cjcmm.com.cn/cjcmm/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20141903&flag=1