%0 Journal Article
%T 白花丹参鲨烯合酶SQS2的克隆与原核表达分析
%A 荣齐仙
%A 姜丹
%A 查良平
%A 申业
%A 张燕
%A 黄璐琦
%J 中国中药杂志
%D 2015
%X 该研究根据丹参的转录组数据提供的基因片段设计引物,采用逆转录聚合酶链式反应方法,从白花丹参中克隆鲨烯合酶SQS2的全长cDNA序列,命名为SmSQS2,GenBank注册号KM244731。序列长度为1597bp,包含1245bp的开放阅读框,推测编码414个氨基酸,含有115bp的5'UTR和237bp的3'UTR。利用生物信息学软件对获得的序列进行同源性分析,得出白花丹参SQS2的与紫花丹参SQS2的序列无明显差异。原核表达分析结果表明SmSQS2在大肠杆菌中能表达出与预测蛋白大小相当的目标蛋白,对影响蛋白表达的4个因素,即诱导温度、诱导时间、IPTG浓度和诱导时宿主菌的吸光度(A600)进行了优化,得出SmSQS2蛋白表达的最佳条件为:IPTG终浓度0.2mmol·L-1,宿主菌的吸光度(A600)为0.6,温度30℃,诱导时间20h。这为进一步研究白花丹参鲨烯合酶SQS2在丹参萜类和甾醇类生物合成途径中的作用提供了理论依据。
%K 白花丹参
%K SQS2
%K 克隆
%K 原核表达
%U http://www.cjcmm.com.cn/cjcmm/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20150707&flag=1