%0 Journal Article
%T 北柴胡UGT基因的克隆及其过量表达和RNAi转基因载体的构建
%A 隋春
%A 徐洁森
%A 赵立子
%A 魏建和
%A 徐艳红
%A 孙鹏
%J 中国中药杂志
%D 2012
%X 目的:克隆北柴胡中可能参与柴胡皂苷生物合成的UGT基因,构建其过表达和抑制表达的转基因载体,为通过转基因验证其功能奠定基础。方法:在454高通量测序已获得部分cDNA序列基础上,通过RACE和LD-PCR方法扩增全长cDNA克隆。设计含有酶切位点的PCR引物,PCR扩增UGT基因的ORF和部分片段后,酶切,分别插入到pCAMBIA-SUPER,1300和pHANNIBAL中。重组的pHANNIBAL经NotI酶切后插入到pART27中。最终以构建出过表达和抑制表达的转基因载体。结果:扩增到了北柴胡1个UGT基因全长cDNA克隆,构建了这一基因的过表达和抑制表达转基因载体。结论:通过UGT基因的全长cDNA克隆和转基因载体构建,为后续开展转基因研究,验证其生物功能奠定了基础。
%K 北柴胡
%K UGT基因
%K 转基因载体
%U http://www.cjcmm.com.cn/cjcmm/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20120504&flag=1