%0 Journal Article
%T 铁皮石斛均一化全长cDNA文库的构建与序列分析
%A 蒋敏
%A 王江
%A 文国松
%A 徐绍忠
%A 查应洪
%A 容天聚
%A 钱雄
%J 中国中药杂志
%D 2013
%X 目的:为了获得药用植物铁皮石斛功能基因的信息和筛选功能基因。方法:以SMART(switchingmechanismat5'endofRNAtranscript)方式合成全长cDNA,结合DSN(duplex-specificnuclease)均一化技术,构建铁皮石斛茎组织的均一化全长cDNA文库。结果:该文库重组率为93.9%,文库滴度1.3×106cfu·mL-1,插入片段平均大小1.5kb左右。随机挑取163个阳性克隆进行单侧测序,通过生物信息学分析,获得150个单一序列,其中147个序列与相应的同源蛋白匹配,GO(geneontology)分类表明这些序列参与各种生化途径。8个序列包含了完整编码框,可判断为全长基因。结论:成功构建了铁皮石斛茎组织均一化全长cDNA文库,为满足铁皮石斛代谢途径等功能基因筛选和基因信息研究奠定了基础。
%K 铁皮石斛
%K 均一化
%K cDNA文库
%K 序列分析
%U http://www.cjcmm.com.cn/cjcmm/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20130409&flag=1