%0 Journal Article
%T 东方山羊豆盐诱导抑制差减杂交文库构建及其表达序列标签分析
%A 宋清晓
%A 王学敏
%A 高洪文
%A Dzyubenko N
%A Chapurin V
%A 韩永增
%A 杨冬梅
%A 李玉坤
%J 植物遗传资源学报
%D 2010
%X 为筛选东方山羊豆盐诱导差异性基因,以250mmol/LNaCl处理的东方山羊豆cDNA为实验组,未经诱导刺激的为驱动组,利用抑制性消减杂交技术(SSH)构建消减文库并对其部分阳性克隆进行了ESTs序列分析。该消减文库克隆的重组率为92%,插入片段大部分集中在0.2～1kb之间。随机挑取500个克隆进行测序及同源性分析,获得258个cleanESTs,经聚类、拼接,去除冗余序列,共获得132个Unigene,其中含有32个contigs和100个singlets,该文库的冗余度为24%。对其进行功能预测及分类,得到大量参与信号转导、转录调控、渗透和代谢调节、机体防御以及光作用等过程的相关基因。随机选择非重复的4个差异表达的序列设计引物,以半定量PCR方法验证其消减效率,结果显示,诱导组的表达量显著高于非诱导组,表明该文库有较高质量,且所采用的技术手段有助于快速发现东方山羊豆新功能基因。
%K 东方山羊豆
%K 盐诱导
%K 抑制消减杂交
%K ESTs
%K RT-PCR
%U http://www.zwyczy.cn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=2010136&flag=1