%0 Journal Article
%T 扁桃CBF1转录因子的克隆及原核表达分析
%A 张亮
%A 李疆
%A 代培红
%A 李鹏
%A 罗淑萍
%A 彭弯弯
%J 植物遗传资源学报
%D 2015
%X 为了探明CBF转录因子在扁桃中的抗寒分子机理，以新疆栽培扁桃‘矮丰’叶片为材料，通过PCR技术从扁桃基因组DNA中获得CBF1转录因子，命名为AF-PdCBF1，GenBank登录号为KM245570。序列分析表明，该基因开放阅读框为729bp，编码242个氨基酸，推测蛋白质分子量为27.405kD，并且该蛋白没有信号肽。进化树分析表明，AF-PdCBF1与甜樱桃与中国梅的亲缘关系最近。将该基因片段连接到原核表达载体pET-32a（+）中，构建融合表达质粒pET-PdCBF1，转化到E.coliRosetta(DE3)中进行表达。SDS-PAGE电泳检测结果表明，表达蛋白与预期大小一致，分子量大小约为47.8kD。对重组蛋白的诱导条件进行优化后结果表明，重组蛋白pET-PdCBF1在IPTG浓度为0.2mmol/L、诱导4h时，其表达量最佳。试验结果可为进一步纯化和鉴定目的蛋白及研究其功能奠定基础。
%K 扁桃
%K CBF1转录因子
%K 原核表达
%U http://www.zwyczy.cn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20141023003&flag=1