%0 Journal Article %T 罗非鱼trap分子标记反应体系优化设计方案的比较 %A 马庆男 %A 董在杰 %A 朱文彬 %A 苏胜彦 %A 张宁 %A 袁新华 %A 杨弘 %J 南方水产科学 %P 28-34 %D 2013 %R 10.3969/j.issn.2095-0780.2013.01.005 %X 靶位区域扩增多态性(targetregionamplificationpolymorphism,trap)是一种新型功能性分子标记,比较l16(45)正交试验和单因素方法优化罗非鱼(oreochromisspp.)trap反应体系。2种分析方法结果中dntps浓度、随机引物浓度、dna浓度相同而镁离子(mg2+)浓度和taqdna聚合酶浓度不同,不同因素间存在一定的交互作用。正交设计方法比单因素法更简单、科学、合理。该试验获得罗非鱼15μltrap最优反应体系为dna模板浓度为60ng、mg2+浓度为1.5mmol?l-1、dntps浓度为0.3mmol?l-1、taqdna聚合酶0.5u、随机引物浓度为7pmol?l-1和固定引物浓度为10pmol?l-1。该反应体系在4个罗非鱼群体中验证,表现出良好的稳定性和重复性,该反应体系的建立为trap标记应用于罗非鱼遗传多样性评价、种质鉴定、分子标记辅助育种等研究提供了新的手段。 %K 罗非鱼 %K trap %K 正交设计 %K 单因素试验 %K 优化 %U http://www.schinafish.cn/CN/abstract/abstract8999.shtml