%0 Journal Article
%T 罗非鱼无乳链球菌lrrg-sip融合基因原核表达载体的构建及表达
%A 曾祖聪
%A 曹建萌
%A 卢迈新
%A 可小丽
%A 刘志刚
%A 高风英
%A 朱华平
%J 南方水产科学
%P 17-23
%D 2014
%R 10.3969/j.issn.2095-0780.2014.05.003
%X lrrg和表面免疫原性蛋白（sip）是无乳链球菌（streptococcusagalactiae）的2种表面蛋白，具有良好的免疫原性。为获得罗非鱼无乳链球菌表面蛋白lrrg和sip蛋白的融合蛋白，该试验采用基因拼接技术中的双酶切法分2步逐个将sip和lrrg基因插入pcold？ⅱ载体中，构建原核表达载体pcoldⅱ-lrrg-sip。将成功构建的融合基因原核表达载体转化感受态细胞bl21（de3），进行诱导表达条件的优化。结果显示，15℃、iptg0.5mmol？l-1、诱导9h，目的蛋白呈可溶状态的表达量最高。westernblot检测结果显示lrrg-sip融合蛋白大小与预测一致（162kda），说明成功构建了融合基因，为罗非鱼源无乳链球菌亚单位疫苗的研制奠定了基础。
%K 罗非鱼
%K 无乳链球菌
%K lrrg、sip
%K 融合基因
%K 原核表达载体
%U http://www.schinafish.cn/CN/abstract/abstract9163.shtml