%0 Journal Article %T 基于est库的枳apetala2基因cdna克隆及其表达分析 %A 宋长年 %A 房经贵 %A 王晨 %A 上官凌飞 %A 章镇 %J 园艺学报 %P 799-806 %D 2009 %X 根据物种间同源基因相对保守的特点,利用生物信息学方法以拟南芥apetala2cdna序列作为模板,对柑橘est数据库进行同源检索筛选,克隆了柑橘apetala2基因的cdna序列,并以枳[poncirustrifoliata(l.)raf.]花cdna为模板,根据以上cdna序列设计特异引物,利用race技术分别获得该基因的5'和3'末端,序列拼接后获得枳的apetala2cdna全长。该cdna全长为1980bp,命名为pt-ap2。pt-ap2核苷酸序列有一个1539bp完整的开放读码框(orf),5'末端起始密码子atg其始于290bp,3'末端非翻译区为152bp,其中含有27bp的ploy+(a)。该基因已在genbank基因数据库注册,注册号为eu883665。推导该cdna编码512个氨基酸,与苹果、矮牵牛和拟南芥中相应序列同源性分别为59.1%,59.7%和63.8%。序列分析表明,pt-ap2除了具备完全保守的核定位信号序列(kksr)外,还具有两个高度保守的重复序列即ap2结构域。分别采用半定量rt-pcr和sybrgreeni实时定量rt-pcr方法分析pt-ap2在枳叶、茎、根、花和果等不同器官中的表达水平,结果一致表明pt-ap2在各个器官中的表达水平不同,花中的表达量最高,果实中的表达量最低。 %K 柑橘 %K 枳 %K 花器官发育 %K 基因 %K 表达分析 %U http://www.ahs.ac.cn/CN/abstract/abstract601.shtml