%0 Journal Article %T 温州蜜柑萎缩病毒小外壳蛋白基因克隆与原核表达及其抗体制备 %A 武改霞 %A 李婷婷 %A 孙现超 %A 青玲 %J 园艺学报 %P 64-72 %D 2012 %X 用rt-pcr方法,从采自重庆奉节的‘宫本’柑橘的2个样品中扩增出温州蜜柑萎缩病毒(satsumadwarfvirus,sdv)sdvrna2的3′末端,长度为975bp,与报道的sdvs-583′末端序列同源性分别为98.7%和98.4%。根据获得的序列设计引物,以含有sdvfj3′末端序列的质粒为模板,pcr扩增获得大小为654bp的sdv-fj小外壳蛋白(smallcoatprotein,cps)基因产物。构建了cps与gst融合表达载体pgex-cps,在37℃、1.0mmol·l-1iptg条件下诱导表达,sds-page电泳分析表明成功表达出分子量约为42kd的gst-cp融合蛋白。以表达的融合蛋白为抗原免疫家兔,制备的抗血清的效价为1/12800。用获得的抗体进行组织印迹分析表明,sdv在柑橘叶柄基部韧皮部维管束区域含量最高。 %K 柑橘 %K 温州蜜柑萎缩病毒 %K 小外壳蛋白 %K 原核表达 %K 抗体 %U http://www.ahs.ac.cn/CN/abstract/abstract3519.shtml