%0 Journal Article %T 葡萄4种病毒多重rt-pcr检测体系的建立 %A 范旭东 %A 董雅凤 %A 张尊平 %A 任芳 %A 李亚惠 %J 园艺学报 %P 949-956 %D 2012 %X 以复合感染4种病毒的‘红地球’(redglobe)葡萄样品为试材,对影响多重pcr的dntps浓度、taq酶浓度、引物浓度、退火温度及模板量进行了调整和优化,建立了能同时检测葡萄卷叶伴随病毒3(grapevineleafroll-associatedvirus-3,glrav-3)、沙地葡萄茎痘相关病毒(grapevinerupestrisstempittingassociatedvirus,grspav)、葡萄病毒b(grapevinevirusb,gvb)和葡萄病毒a(grapevinevirusa,gva)的多重rt-pcr方法。灵敏度测验结果显示,多重rt-pcr与单一rt-pcr检测灵敏度基本一致。多重rt-pcr获得的特异性片段大小分别为905、546、460和196bp,经过克隆、测序及序列比对,表明其序列与已报道的病毒序列具有较高的同源性。对7个已知带病毒的葡萄样品进行检测验证的结果表明,所建立的多重rt-pcr技术可用于大量田间样品中这些病毒的检测。 %K 多重rt-pcr %K 检测 %K 葡萄卷叶伴随病毒3 %K 沙地葡萄茎痘病毒 %K 葡萄病毒b %K 葡萄病毒a %U http://www.ahs.ac.cn/CN/abstract/abstract3662.shtml