%0 Journal Article %T 南方红豆杉转录组ssr挖掘及分子标记的研究 %A 李炎林 %A 杨星星 %A 张家银 %A 黄三文 %A 熊兴耀 %J 园艺学报 %P 735-745 %D 2014 %X 利用trinity软件对ncbi公共数据库中公布的南方红豆杉(taxuschinensisvar.mairei)根、茎和叶的转录数据进行转录组的重新拼接。通过对13737528条序列组装得到96279条unigenes(38mb),通过ssr检测程序从96279条unigenes中得到2160个ssr位点(2.24%),其平均发生率为1/18.01kb,基序长度为14~25bp之间。优势重复基序为六核苷酸和三核苷酸,分别占总ssr位点的38.56%和37.08%。2160个ssr位点由703种重复基序构成,其中六核苷酸占60.96%,主要分布在3~4重复;二、三核苷酸占总ssr位点的44.81%,其中以(ag/ct)n、(at/at)n、(aag/ctt)n、(agc/ctg)n、(agg/cct)n和(atc/atg)n重复基序最为丰富,合占总ssr重复类型的34.73%,并出现少量的(cg/cg)n和(ccg/cgg)n重复。通过l9(34)正交试验得到最优的ssr-pcr体系,10μlpcr体系中含dna20ng,1×pcr缓冲液,mgcl220mmol,dntps0.35mmol,引物0.25μmol,taq酶0.45u。随机挑选62对ssr引物进行8个南方红豆杉株系的ssr扩增,有效扩增率为53.23%,多态性比率为38.71%。这些多态性转录组ssr引物的开发为红豆杉遗传多样性的分析、分子标记辅助育种、遗传图谱构建和功能基因的挖掘提供了更丰富的标记。 %K 红豆杉 %K 转录本 %K 引物 %K ssr %U http://www.ahs.ac.cn/CN/abstract/abstract4399.shtml