%0 Journal Article %T 柑橘半胱氨酸蛋白酶基因cscysp的分离、亚细胞定位及表达分析 %A 马岩岩 %A 张军 %A 陈娇 %A 张凌云 %A 朱世平 %A 闫树堂 %A 钟广炎 %J 园艺学报 %P 621-630 %D 2014 %X 以‘奥林达’夏橙[citrussinensis(l.)‘olinda’]为材料,采用rt-pcr结合race技术从果萼离层中分离到1个半胱氨酸蛋白酶类基因,命名为cscysp(genbank登录号:kj093387)。该基因的cdna全长为1485bp,开放阅读框(orf)为1083bp,推测可编码360个氨基酸残基的多肽。其基因组序列与cdna比对后显示有3个内含子。分析发现,cscysp属于papain-like(木瓜蛋白酶,c1a)家族的半胱氨酸蛋白酶,与拟南芥、大豆、烟草、杨树等的同源蛋白有73%~83%的相似性。亚细胞定位结果显示cscysp蛋白定位在细胞壁上。qrt-pcr结果表明cscysp在老叶、成熟果实果萼离层和花中的表达量明显高于幼苗的根、茎、叶。cscysp的表达被脱落酸、高盐和peg6000诱导,低温、乙烯、芸薹素内酯、水杨酸和甲基茉莉酸可抑制其表达。利用基因工程手段获得了柑橘过表达cscysp的5个转基因株系。 %K 柑橘 %K 半胱氨酸蛋白酶 %K 逆境 %K 基因表达 %U http://www.ahs.ac.cn/CN/abstract/abstract4388.shtml