%0 Journal Article %T 芥菜开花调控蛋白svp与flc酵母表达载体的构建及其相互作用研究 %A 汤青林 %A 李念祖 %A 丁宁 %A 陈竹睿 %A 宋明 %A 王志敏 %J 园艺学报 %P 1175-1182 %D 2012 %X 为深入研究芥菜开花信号整合子的两个核心调节因子shortvegetativephase(svp)与floweringlocusc(flc)相互作用的分子机理,通过pcr扩增,从芥菜材料‘qj’中分别克隆含ecorⅰ/bamhⅰ双酶切位点的svp和flc编码区全长,并利用酵母双杂交体系,将flc与gal4报告基因dna激活域融合(pgadt7flc),svp与gal4报告基因dna结合域融合(pgbkt7svp)。两种重组质粒分别转化酵母y187和y2hgold后未出现自激活和毒性现象。融合的二倍体酵母(pgadt7flc×pgbkt7svp)能在选择性固体培养基qdo/x/a(sd/-ade/-his/-leu/-trp/x-α-gal/aba)上生长,并且菌落呈蓝色。将诱饵质粒(pgbkt7svp)与猎物质粒(pgadt7flc)载体互换(pgadt7svp、pgbkt7flc),再次转化酵母后仍能融合成二倍体酵母(pgadt7svp×pgbkt7flc),并同时激活报告基因aur1-c、his3、ade2、mel1,由此表明svp与flc蛋白能够相互结合。 %K 芥菜 %K svp %K flc %K 酵母双杂交 %U http://www.ahs.ac.cn/CN/abstract/abstract3696.shtml