%0 Journal Article %T 柑橘caps标记和as-pcr引物的开发 %A 雷天刚 %A 何永睿 %A 彭爱红 %A 许兰珍 %A 刘小丰 %A 姚利晓 %A 邹修平 %A 江东 %A 陈善春 %J 园艺学报 %P 1027-1034 %D 2012 %X 以从genbank中下载的93955条甜橙[citrussinensis(l.)osbeck]est序列为源序列,利用qualitysnp软件包从中挖掘出1521个单核苷酸多态性(singlenucleotidepolymorphism,snp)候选位点。进一步利用酶切位点查找软件watcut进行分析,发现其中125个snp为酶切扩增多态性序列(cleavedamplifiedpolymorphicsequences,caps)位点。随机挑选40个caps候选位点设计引物,对12个含多种类型的柑橘品种进行分型,以此验证各标记的有效性。同时,还挑选了25个经生物信息学预测可导致其编码蛋白氨基酸序列改变的snp位点,分别设计出一组等位基因特异pcr(allelespecificpcr,as-pcr)引物,以6个不同类型柑橘品种的dna为模板进行pcr扩增,扩增产物采用琼脂糖凝胶电泳进行检测,筛选多态性引物。结果显示,40个caps候选位点中有26个位点具有酶切扩增多态性,且分型结果稳定,可作为caps标记。此外,还筛选获得15组在不同柑橘品种间检测到多态性的as-pcr引物,重复性好,可有效用于柑橘品种的snp分型。 %K 柑橘 %K 表达序列标签 %K 单核苷酸多态性 %K 酶切扩增多态性序列 %K 等位基因特异pcr %U http://www.ahs.ac.cn/CN/abstract/abstract3679.shtml