%0 Journal Article %T 马铃薯抗晚疫病基因rb、r3a过表达及r3a特异性识别关键结构域的确定 %A 梁春波 %A 陈伊里 %A 李颖 %A 黄三文 %J 园艺学报 %P 87-94 %D 2011 %X 通过将马铃薯抗晚疫病基因rb、r3a编码区克隆到具有组成型camv35s强启动子的双元表达载体上,结合农杆菌介导的瞬时表达,分析过表达条件下rb-avrb,r3a-avr3a的特异性识别情况。并利用重叠延伸pcr实现r3a与同源序列i2ga1在卷曲螺旋(cc)、核酸结合位点(nbs)和富含亮氨酸重复序列(lrr)三个结构域的互换,根据过敏性反应(hypersensitiveresponse,hr)是否被阻断分析各个结构域对特异性识别的影响,确定特异性识别的关键结构域。结果表明:camv35s启动子驱动的rb基因在表达量上较自身启动子有明显提高,使hr反应加快;r3a的表达量和特异性识别avr3a诱导产生hr反应的速度在两者之间均无明显差别。另外,r3a与i2ga1在lrr区域序列发生交换后,识别avr3a诱导产生hr反应的能力也发生了交换,即r3a特异性识别avr3a的关键序列位于lrr结构域内。 %K 马铃薯 %K 晚疫病 %K 重叠延伸pcr %K 结构域交换 %K 瞬时表达 %U http://www.ahs.ac.cn/CN/abstract/abstract2520.shtml