%0 Journal Article %T 小麦ArfGAP基因的克隆、半定量RT-PCR分析及原核表达 %A 许峰 %A 闫素辉 %A 张从宇 %A 时侠清 %A 李文阳 %A 张子学 %J 麦类作物学报 %P 1631-1638 %D 2015 %R 10.7606/j.issn.1009-1041.2015.12.004 %X 为明确小麦ArfGAP基因在非生物胁迫中所行使的功能,采用电子克隆技术分离普通小麦ArfGAP基因后对其在不同非生物胁迫下的表达特性进行了分析,并在大肠杆菌中表达了该基因。结果表明,从扬麦18号中克隆得到的TaArfGAP基因ORF全长为2121bp。生物信息学分析表明,TaArfGAP蛋白氨基端方向存在一个典型的ArfGAP蛋白结构域,在亲缘关系上与山羊草、乌拉尔图小麦和短柄草较近,而与甘蓝等作物关系较远。半定量RT-PCR分析表明,TaArfGAP基因在干旱、PEG和NaCl胁迫下显著上调表达,但在高温条件下则显著下调表达。SDS-PAGE检测结果表明,IPTG终浓度为0.8~1.0mmol·L-1、诱导温度为24℃及诱导时间为10h时,在分子量大小为81kD左右可以得到较大的可溶性表达蛋白量,且与预期结果一致,说明TaArfGAP基因在原核表达体系中成功表达。 %K 小麦 %K ADP核糖基化因子GTP水解酶激活蛋白 %K 半定量RT-PCR %K 融合蛋白 %U http://www.tcrop.net/mlzwxb/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20151204&flag=1