%0 Journal Article %T 内参法在线粒体DNA纯度鉴定中的应用 %A 袁正杰 %A 张改生 %A 孙瑞 %A 胡俊敏 %A 位明明 %A 张龙雨 %A 李红霞 %A 陈蕊红 %A 牛娜 %A 马守才 %J 麦类作物学报 %P 1088-1093 %D 2009 %R 10.7606/j.issn.1009-1041.2009.06.027 %X 为了确定普通差速离心法提取的小麦线粒体DNA(mtDNA)的纯度,以小麦肌动蛋白β亚基(βActin)、1,5二磷酸核酮糖羧化酶/加氧酶大亚基(RabcL)和细胞色素C氧化酶第三亚基(COXIII)基因的片段作为内参标记,依靠聚合酶链式反应(PCR)及琼脂糖凝胶电泳技术,对提取的mtDNA进行了检测。结果表明,普通差速离心法提取的mtDNA中混杂有核DNA和叶绿体DNA(ctDNA)。对提取的mtDNA稀释后再进行内参法检测,结果发现,当mtDNA稀释到DNA原液的300~400倍时,混杂其中的核DNA已达不到PCR反应的敏感度,但mtDNA、ctDNA仍能满足作为PCR反应体系模板的要求。此时,提取到的mtDNA可视为无核DNA污染的细胞质基因组DNA。 %K 小麦 %K 线粒体DNA %K 内参法 %K 纯度鉴定 %U http://www.tcrop.net/mlzwxb/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20090627&flag=1