%0 Journal Article %T 青稞B组醇溶蛋白基因5''''上游调控区的TAIL-PCR克隆及序列分析 %A 韩兆雪 %A 吴芳 %A 赵桃 %A 杨凡 %A 钱刚 %A 余懋群 %J 麦类作物学报 %P 613-618 %D 2007 %R 10.7606/j.issn.1009-1041.2007.04.148 %X 为了阐明青稞种子中B组醇溶蛋白合成的遗传调控机制,为分子改良大麦和小麦籽粒品质奠定基础,以青稞品种Z09和Z26的基因组DNA为模板,根据已克隆的青稞B组醇溶蛋白(B-hordein)基因的5'端序列设计三个基因特异的反向引物,分别与随机简并引物配对,进行热不对称嵌套PCR(ThermalasymmetricinterlacedPCR,TAIL-PCR)扩增,从两份西藏青稞材料中分离克隆出2个B-hordein基因的上游调控序列.序列测定结果表明,两个扩增片段长度分别为395和396bp,加上已知B-hordein基因中的GSP2引物序列与翻译起始密码子之间198bp的长度,则可得到约600bp的B-hordein基因5'上游调控序列.将所得序列与Genbank中的三个贮藏蛋白基因的对应区段进行序列比对,所得序列与来自野生智利大麦(H.chilense)的B3-hordein基因(Genbank登录号:AY998010)、普通小麦(T.aestivum)的低分子量麦谷蛋白亚基基因(Genbank登录号:X07747)和栽培大麦(H.vulgare)的B-hordein基因(Genbank登录号:X03103)具有81%~95%的序列相似性.推测其TATAbox位于-80bp,CAAT-likebox位于-140bp处.另外,在-300bp处存在一个胚乳盒(EndospermBox,EB),包含EM基序和GCN4基序.EM基序高度保守,GCN4基序有一个核苷酸位点的突变.此外,在约-560bp处存在一个胚乳盒类似结构. %K 青稞 %K B-hordein基因 %K 上游调控序列 %K TAIL-PCR %K 序列分析 %K 青稞 %K 醇溶蛋白基因 %K 上游调控区 %K 克隆 %K 序列分析 %K Gene %K Cloning %K Sequence %K Analysis %K Highland %K Barley %K 结构 %K 突变 %K 酸位 %K 核苷 %K 高度 %K 基序 %K Endosperm %K 胚乳 %K 存在 %K 序列相似性 %K vulgare %U http://www.tcrop.net/mlzwxb/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=200704148&flag=1