%0 Journal Article %T 柑橘无标记转基因转化体系的建立 %A 李琳洁 %A 杨莉 %A 李芳 %A 谢玉明 %A 曾柏全 %A 邓子牛 %J 湖南农业大学学报(自然科学版) %D 2010 %X 采用1个结合化学诱导系统XVE和位点专一性重组系统Cre/LoxP的标记基因剔除载体,对柑橘进行无标记转基因研究.此载体可通过β-雌二醇诱导表达系统控制重组酶系统Cre 基因表达来剔除标记基因nptⅡ.将侵染后糖橙节间茎段接种在(MS+3 mg/L BA)培养基上,共培养(暗培养)3 d后转移到筛选培养基(MS+75 mg/L Kan+500 mg/L Cef)中.在筛选抗性再生芽后,切下带1~2 mm外植体的抗性芽,转移至含有?-雌二醇的化学诱导培养基( MS+3 mg/L BA+ 500 mg/L 头孢霉素+2 μmol/L ?-雌二醇)上诱导,15 d后用荧光显微镜观察,成功观测到绿色荧光.进行试管嫁接,30 d后,提取接穗基因组DNA进行PCR扩增,检测到DNA的切除现象.研究结果表明此化学诱导切除标记基因系统应用在柑橘上是可行的. %K 柑橘 %K 无标记转基因体系 %K 化学诱导 %K 标记基因 %K ? %K -雌二醇 %U http://xb.ijournal.cn/hnndzr/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20100201&flag=1