%0 Journal Article %T 皱边石杉内生真菌ISSR-PCR反应条件的优化 %A 史云峰 %A 禹利君 %A 刘仲华 %J 湖南农业大学学报(自然科学版) %D 2012 %X 以从皱边石杉中分离纯化出的99株内生真菌DNA为材料,优选出10条ISSR引物(UBC842、UBC848、UBC850、UBC856、UBC861、UBC864、UBC868、UBC873、UBC880、UBC887)的最适退火温度,并对其进行ISSR–PCR反应体系单因素试验及正交试验优化,建立皱边石杉内生真菌ISSR–PCR的优化反应体系,即25 μL 反应体系中,10×PCR Buffer(Mg2+浓度为2.0 mmol/L)2.5 μL,dNTPs(10 mmol/L)0.6 μL,引物(10 pmol/μL)2.0 μL,Taq E(1 U/μL)1.5 μL,DNA 模板(10 ng/μL)3 μL,无菌ddH2O 15.4 μL。以UBC873引物对99株内生真菌基因组DNA进行PCR扩增,初步获知皱边石杉内生真菌资源的遗传多样性非常丰富。 %K 皱边石杉 %K 内生真菌 %K 内部简单重复序列 %K 正交试验 %U http://xb.ijournal.cn/hnndzr/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20120018&flag=1