%0 Journal Article
%T 一种构建载体的新方法：一步式混合胶回收连接法
%A 刘双清
%A 成小文
%A 李顺姬
%A 胡珏
%A 黄国华
%J 湖南农业大学学报(自然科学版)
%D 2015
%X 以构建原核表达载体重组质粒G4FPAGB1为例，介绍了一种新的载体构建方法。棉铃虫单核衣壳核多角体病毒G4毒株基因组上的Ha–FP–A片段用Hin d Ⅲ和Eco RⅤ双酶切，Ha–FP–B片段用XhoⅠ和Bam HⅠ双酶切，绿色荧光蛋白(Green fluorescent protein，GFP)基因片段用Eco RⅤ和XhoⅠ双酶切，载体质粒pBluescript SK (+)用Hin d Ⅲ和Bam HⅠ双酶切。酶切产物经电泳检测后，将所有含目的片段的胶块切下，放在同一个离心管中进行DNA回收，得到的混合DNA产物直接加入连接酶进行连接、转化。结果表明，3个目的片段均成功连接到载体质粒上。本方法可高效、简单地构建包含多个目的片段的重组质粒
%K 载体构建 克隆方法 一步式混合胶回收
%U http://xb.ijournal.cn/hnndzr/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=2015010111&flag=1