%0 Journal Article
%T 重组谷胱甘肽-S-转移酶-肝素酶Ⅰ在大肠杆菌中的表达、纯化及其性质
%A 张云康
%A 高兴
%A 汪德健
%A 王富军
%A 赵健
%J 华东理工大学学报
%P 458-463
%D 2011
%X 肝素酶Ⅰ(HeparinaseⅠ,HepⅠ)是一种多糖裂解酶，可特异性裂解硫酸肝素分子中糖苷键以制备低分子质量肝素（LMWH）。由于重组肝素酶Ⅰ在大肠杆菌中表达时极易形成包涵体，将肝素酶Ⅰ基因的N端融合谷胱甘肽-S-转移酶（GST）标签，在大肠杆菌中进行低温表达。结果显示，约90%的GST-HepⅠ融合蛋白以可溶性形式表达，表达的目标蛋白粗酶经过一步亲和纯化，比活为124.7U/mg，纯化倍数达到366.7倍，酶活回收率为31.0%；结果表明Ca2+对重组GST-HepⅠ有很强的激活作用，GPC-HPLC结果显示重组GST-HepⅠ与天然肝素酶Ⅰ裂解图谱相同。
%K 肝素黄杆菌
%K 谷胱甘肽-S-转移酶
%K 肝素酶Ⅰ
%K 融合表达
%K 亲和纯化
%U http://journal.ecust.edu.cn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=201104012&flag=1