%0 Journal Article %T 谷胱甘肽合成酶系基因协调表达体系的构建 %A 尧辉 %A 魏东芝 %A 周宇荀 %A 沈立新 %A 刘寿春 %J 华东理工大学学报 %P 144-148 %D 2002 %X 通过PCR获得E.coliB谷胱甘肽合成酶系基因(gshI,gshII)片段,结合定点突变稀有起始密码子,设定gshI与gshII位置与距离,构建双顺反子重组表达载体pTrc99A/gshI-gshII,建立GSHI、GSH-II蛋白表达体系。结果表明:以0.08mmol/LIPTG于28℃诱导工程菌E.coliBL21(DE3)(pTrc99A/gshI-gshII),GSH-I、GSH-II蛋白比为4.5∶1(m∶m)时谷胱甘肽合成能力最高,达到每克湿菌体8.5mg。通过构建单顺反子重组表达载体pTrc99A/gshI、pTrc99A/gshII测定GSH-I与GSH-II蛋白的最适配比,结果表明:在GSH-I、GSH-II蛋白总量恒定的情况下,要提高谷胱甘肽产率,两者比例以3∶1~6∶1为宜 %K 谷胱甘肽 %K 合成酶系 %K 蛋白表达体系 %K 双顺反子重组表达载体 %K 协调表达 %U http://journal.ecust.edu.cn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20020241&flag=1