%0 Journal Article
%T B淋巴细胞刺激因子基因的克隆及在大肠杆菌中的高效表达
%A 王锦之
%A 周卿
%A 周宇荀
%A 马昱澍
%A 魏东芝
%J 华东理工大学学报
%P 249-252
%D 2005
%X 聚合酶链式反应(PCR)扩增获得了编码BLys(134—285AA)的cDNA片段，该片段以限制性内切酶BglⅡ和HindⅢ双酶切插入pET32a载体。测序表明除(ATA^263→ATG^263)突变并导致了氨基酸(1263M)突变外，其余序列与Genbank报道的序列一致。蛋白表达用异丙基-β-硫代半乳糖苷(IPTG)诱导，SDS—PAGE表明：在33ku处有明显的融合蛋白表达，其表达水平高达总茵体蛋白的50％。点印迹证实融合蛋白能与anti—His6Tag抗体反应。生物学活性研究表明BLys协同丝裂霉素能明显地抑制HeLa细胞的生长。
%K B淋巴细胞刺激因子
%K 大肠杆菌
%K 克隆和表达
%K 丝裂霉素
%K 协同作用
%U http://journal.ecust.edu.cn/ch/reader/view_abstract.aspx?file_no=20050269&flag=1